Objetivos:

O FIGHT-TWO pretende criar uma vacina oral segura (pathogen-free), para ser distribuída no campo, incorporada em ração adequada ao coelho-bravo. A administração desta vacina não depende da captura e manipulação dos animais, aspeto absolutamente crítico para o sucesso da vacinação de populações selvagens. A ingestão espontânea da vacina em forma de isco, tem o potencial de conseguir proteger uma ampla proporção das populações de coelho-bravo, um aspeto crucial para levar à interrupção das cadeias de transmissão do vírus no ambiente e consequentemente, potencializar ao controlo da infeção nas áreas afetadas.

Atividades:

1. Seleção de estirpes de RHDV2, amplificação e clonagem do gene da capside, e construção de plasmídeos recombinantes contendo o gene vp60 de estirpes de campo de RHDV2; produção baculovirus recombinante contendo o gene vp60;
2. Produção e purificação de VLPs em células de inseto infetadas; avaliação estrutural e funcional das VLPs (eletrônica microscopia, hemaglutinação e western blotting);
3. Produção de um soro imune contra RHDV2 em coelho doméstico usando uma vacina e desenvolvimento de i- ELISA para a deteção específica de anticorpos RHDV2;
4. Avaliação da resistência das VLPs à temperatura, humidade e liofilização;
5. Imunização por via oral de coelhos domésticos e silvestres em instalações laboratoriais controladas, com suspensões de VLP; Challenge com vírus infecioso para avaliação da proteção imunológica conferida pela vacina;
6. Testagem da imunidade induzida pela vacina em coelhos-bravos mantidos em cercado;
7. Determinação da cinética da resposta imune à vacinação oral;
8. Registo de patente e divulgação de resultados;

1. Determinação das melhores condições de produção e purificação das VLPs em termos de rendimento e custos de produção;
2. Obtenção de VLPs
3. Determinação da dose de VLPs (em µg) necessária para a imunização oral de coelhos domésticos e de coelhos-bravos.
4. Determinação da capacidade imunogénica e protetora das VLPs
5. Implementação de ELISA indireta para deteção de anticorpos para RHDV2