Designação do projeto | VitiRoots: o papel dos miRNAs na resposta à seca de porta-enxertos de Vitis Código do projeto | LISBOA-01-0145-FEDER-031907 Objetivo principal | A presente proposta tem como objetivo contribuir para um uso racional e eficiente dos recursos hídricos, e fornecer informação aos produtores associações de produtores e viveiristas que lhes permita tomar decisões baseadas em conhecimento, nomeadamente na seleção e utilização de porta-enxertos melhor adaptados à seca. Região de intervenção | 96,87 % Lisboa; 3,13%Centro Entidade beneficiária | Universidade Nova de Lisboa; Instituto Nacional de
Investigação Agrária e Veterinária, I.P. (INIAV, I.P.) Data da aprovação | 06/04/2018 Data de início | 18/10/2018 Data de conclusão | 17/10/2021 Custo total elegível | 232.890.50€; Custo elegível
INIAV | 1.250,00€ Apoio financeiro total da União Europeia | FEDER – 93.437,45€ (INIAV-781,25€)
Apoio OE| 139.453,05€ (INIAV – 468,75€)
Objetivos, atividades e resultados esperados
O
principal objetivo deste projeto é identificar as condicionantes fisiológicas e
moleculares que determinam a resposta de porta-enxertos de videira a condições
de falta de água.Entre
os vários objetivos específicos do projeto estão, para além da divulgação de
conhecimento, através da publicação de artigos em revistas científicas
nacionais e internacionais e da participação em reuniões científicas, o
estabelecimento de parcerias que permitam a disseminação dos resultados junto
do setor produtivo. A tarefa 1 inclui a preparação de
material vegetal e a configuração do ensaio experimental. A
caracterização completa da ecofisiologia das plantas sob stress hídrico é
crucial para o acesso ao efeito diferencial entre os porta-enxertos estudados. Na
tarefa 2, as determinações serão
realizadas ao longo dos ensaios: troca de gás das folhas e análise da
temperatura juntamente com a avaliação do estado hídrico do porta- -enxerto
e medidas do sistema hidráulico radicular. Os dados fisiológicos serão
integrados com os dados moleculares obtidos no âmbito das tarefas seguintes. Na
Tarefa 3, o RNA total será extraído
das raízes em 3 pontos temporais chave: i) controlo; ii) stress moderado e iii)
stress severo. Um total de 54 amostras (3 porta-enxertos x 2 regimes de água x
3 pontos temporais x 3 repetições) serão usadas para produzir as bibliotecas de
miRNAs e sequenciadas numa plataforma Illumina.
Os dados brutos obtidos para cada amostra através do processo de sequenciação
de alto rendimento de miRNA serão analisados posteriormente. A identificação de
miRNAs conservados e novos beneficiará não só dos dados da miRBase
(http://www.mirbase.org/) como também do genoma de Vitis
(http://genomes.cribi.unipd.it/grape/ ). Na
Tarefa 4, será feita a previsão de
alvos e as atribuições funcionais de potenciais genes alvo. O
padrão de expressão dos miRNAs identificados e dos genes alvo será avaliado em
mais detalhes: a PCR quantitativa em tempo real dos miRNAs e alvos selecionados
será estendida a outros pontos de tempo dos ensaios de stress (Tarefa 5). Os
resultados obtidos serão compartilhados com todos os grupos colaboradores e,
sempre que necessário, serão disponibilizados para outros grupos que trabalham
neste campo. Todos os resultados serão difundidos para a comunidade científica,
principalmente através de publicações científicas internacionais, teses de
mestrado e comunicações em conferências nacionais e internacionais. A
acessibilidade para fins mais aplicados (por exemplo, reprodução) será
garantida por contatos próximos e regulares com viveiristas e produtores.
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